實驗室能力驗證和室間比對活動是判定實驗室檢測能力的重要手段之一，不但可以提高實驗室的檢測能力和技術(shù)水平，發(fā)現(xiàn)實驗室操作技術(shù)和質(zhì)量管理上存在的問題，還能增加客戶以及相關(guān)方對實驗室的信任。
今天小編和大家一起來看看微生物能力驗證注意事項有哪些?
01、能力驗證樣品接收及準(zhǔn)備
1、操作前仔細(xì)閱讀參考指導(dǎo)書，關(guān)鍵是小的備注要注意，很多特殊情況的處理大都在備注里。
2、樣品接收前的檢查很重要，首先對樣品的完整性進(jìn)行檢查，對信息的閱讀要全面，如果發(fā)現(xiàn)樣品有問題及時溝通，這樣要比做樣品的時候在發(fā)現(xiàn)來的要及時，能節(jié)省不少的時間;
3、作業(yè)指導(dǎo)書的閱讀要到位，很多能力驗證樣品寄到后要跟一份作業(yè)指導(dǎo)書，作業(yè)指導(dǎo)書中往往會對本次能力驗證的樣品、成分、尺寸、選擇方法、樣品的結(jié)果記錄、包括修約或樣品的粘貼、樣品寄發(fā)的注意事項等有明確的規(guī)定，熟讀這些對試驗準(zhǔn)備有很好的作用。比如有的會要求將試驗后樣品一塊寄發(fā)組織單位，有的實驗室如果不仔細(xì)閱讀的話很容易將測試后樣品立即處理掉，如果寄樣時再看見可就完了。
4、測試前的準(zhǔn)備工作一定要做好，包括設(shè)備的校準(zhǔn)、試運行等，有條件的情況下可以在正式測試前選擇一塊相仿的樣品進(jìn)行一下預(yù)測試，這樣會將測試過程中的問題提前發(fā)現(xiàn)提前解決。對正式測試的操作有幫助。
02、能力驗證樣品預(yù)處理
1、樣品測試過程中的判斷能力很重要，有時候我們在測試中往往會自以為是，為了保證測試過程中的準(zhǔn)確操作最好是找一個經(jīng)驗豐富的作督察，發(fā)現(xiàn)問題及時解決，如果等操作完畢再發(fā)現(xiàn)問題的話可能會因為樣品的消耗而無法驗證結(jié)果;
2、定量項目，西林瓶內(nèi)樣品不可分割，應(yīng)全部用于檢測。一般參考書指導(dǎo)的是加40mL稀釋液制成40mL樣品。
3、定量項目樣品稀釋。指導(dǎo)書標(biāo)明了稀釋范圍的，在稀釋范圍左右各加1個稀釋度進(jìn)行;書上沒有稀釋范圍的，多做稀釋倍數(shù)，選擇合適的稀釋倍數(shù)計數(shù)(一般可稀釋至10-8)。
4、定量項目，除了要多做稀釋倍數(shù)外，同時同一稀釋度要多倒幾皿，從原理上來講，檢測過程屬于隨機(jī)抽樣檢查，平板越多，數(shù)據(jù)越接近真值。考慮性價比，又不可能一直瘋狂一個稀釋度很多平板，所以能力驗證時候多倒幾皿，求好結(jié)果。
5、定性項目有一些重要步驟：
a、增菌及分離步驟尤其重要。選擇合適的增菌液和分離用培養(yǎng)基對目標(biāo)菌的檢出非常關(guān)鍵，選擇兩種以上的增菌液和分離用培養(yǎng)基對菌株作直接分離和增菌后分離。
b、劃線分離十分重要，要把增菌液中的目標(biāo)菌盡量多的表達(dá)出來，要分出單個菌落并盡可能多挑取可疑菌落，確保分離到目標(biāo)菌。
c、生化試驗和血清學(xué)試驗以營養(yǎng)瓊脂平板上的純培養(yǎng)細(xì)菌為好。
03、實驗過程一定要做陰陽對照
陽性對照，是在試驗中，檢驗培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件是否適合，如果在實驗中，陽性實驗沒有生長的話，那這個實驗是失敗的。陰性對照主要是檢測培養(yǎng)基是否污染，在沒有加入任何東西培養(yǎng)時，培養(yǎng)基培養(yǎng)后還是會顯示陽性結(jié)果，這就說明培養(yǎng)基滅菌不徹底，染菌了，這樣也會影響實驗結(jié)果的。
04、培養(yǎng)基方面需要注意地方
1、培養(yǎng)基配制充分混勻后再滅菌
正確做法是用一部分水?dāng)嚢杈鶆蚝?，再加入剩余水量，混勻后滅菌或分裝。
一定要用震蕩器充分混勻水化液，作為檢測原液，普通手搖混勻與經(jīng)震蕩器混勻的樣品液，計數(shù)結(jié)果相差較大。混勻后的樣品嚴(yán)格按照指導(dǎo)書規(guī)定的時間進(jìn)行檢驗。
2、混菌法倒皿要充分混勻
培養(yǎng)基倒完要左5圈右5圈(混勻速度一定要慢，目的是——避免培養(yǎng)基波動到二皿接觸的縫隙部分造成后續(xù)污染)，找較水平位置冷卻凝固。
3、培養(yǎng)基要不要覆蓋問題
覆蓋的目的是為了阻止活菌在培養(yǎng)基表層通過鞭毛移動，造成片狀生長，無法計數(shù)這一不利現(xiàn)象的發(fā)生。這里可以發(fā)揮主觀能動性-對于不運動的菌，可以不覆蓋，對于運動的菌覆蓋。
總結(jié)一下
A、長期檢測同一種樣品，不覆蓋并無蔓延現(xiàn)象，不覆蓋;長期檢測蔓延選擇了覆蓋，一直覆蓋。
B、未知樣品，進(jìn)行覆蓋和不覆蓋的比對實驗，然后決定以后同樣的樣品是否需要覆蓋。養(yǎng)成經(jīng)驗。
C、能力驗證實驗，覆蓋和不覆蓋的都做，不要吝惜那么一點點培養(yǎng)基或耗材，畢竟能力驗證實驗做的漂亮才是實驗室(是室而不是人!)能力的綜合體現(xiàn)。
4、 實驗培養(yǎng)過程勤觀察
微生物培養(yǎng)過程一般需要幾小時到幾十小時，要利用這段時間觀察培養(yǎng)箱及菌生長情況，比如溫度是否穩(wěn)定，培養(yǎng)室內(nèi)濕度如何等等，多思多看，準(zhǔn)備預(yù)案。方有可能得到與盲樣一致的實驗結(jié)果。
原始記錄應(yīng)有條理、思路清晰,完整準(zhǔn)確地記錄菌株鑒定檢驗的全過程,原始記錄要包含檢測時間、檢測現(xiàn)象、檢測結(jié)果三個要素，方便檢測出現(xiàn)問題的溯源。
05結(jié)果判斷
結(jié)果的判定一般根據(jù)設(shè)備操作，但是對于人為操作如評級、手工操作等結(jié)果可能會因為人員的差別而會有不同的偏差，這樣在判定時最好是找有經(jīng)驗的部門負(fù)責(zé)人或質(zhì)量專家一塊定奪，這樣的話會減少很多不必要的錯誤。
